Spas ji bo serdana Nature.com. Guhertoya geroka ku hûn bikar tînin piştgiriya CSS-ê bi sînor e. Ji bo encamên çêtirîn, em pêşniyar dikin ku gerokek nûtir bikar bînin (an jî moda lihevhatinê di Internet Explorer-ê de neçalak bikin). Di vê navberê de, ji bo ku piştgiriya berdewam misoger bikin, em ê malperê bêyî şêwaz û JavaScript-ê nîşan bidin.
Damezrandina modelên heywanan ên guherîna modîk (MC) bingehek girîng e ji bo lêkolîna MC. Pêncî û çar kergoşên spî yên Zelanda Nû li du koman hatin dabeş kirin: koma emeliyata sexte, koma çandina masûlkeyan (koma ME) û koma çandina nucleus pulposus (koma NPE). Di koma NPE de, dîska navbera vertebrayan bi nêzîkatiya cerrahî ya lumbar a anterolateral hate eşkerekirin û derzîyek hate bikar anîn da ku laşê vertebra L5 nêzîkî plakaya dawiyê qul bike. NP bi şîrîngehekê ji dîska navbera vertebrayan a L1/2 hate derxistin û tê de hate derzîkirin. Qulkirina qulikek di hestiyê subkondral de. Prosedûrên cerrahî û rêbazên qulkirinê di koma çandina masûlkeyan û koma operasyona sexte de wekî yên di koma çandina NP de bûn. Di koma ME de, perçeyek masûlkeyan hate nav qulikê, lê di koma operasyona sexte de, tiştek nehat nav qulikê. Piştî emeliyatê, skankirina MRI û ceribandina biyolojîkî ya molekulî hate kirin. Sînyala di koma NPE de guherî, lê di koma operasyona sexte û koma ME de guherînek sînyala eşkere tune bû. Çavdêriya hîstolojîk nîşan da ku li cihê çandinê zêdebûna anormal a tevnan hatiye dîtin, û derbirîna IL-4, IL-17 û IFN-γ di koma NPE de zêde bûye. Çandiniya NP di nav hestiyê subkondral de dikare modelek heywanî ya MC çêbike.
Guhertinên Modîk (MC) lezyonên plakayên dawî yên vertebral û hestiyê hestiyê yên cîran in ku di wênekêşiya rezonansa manyetîk (MRI) de têne dîtin. Ew di kesên bi nîşanên têkildar de pir gelemperî ne1. Gelek lêkolînan girîngiya MC ji ber têkiliya wê bi êşa pişta jêrîn (LBP) tekez kirine2,3. de Roos et al.4 û Modic et al.5 bi serbixwe yekem car sê celebên cûda yên anormaliyên sînyala subkondral di hestiyê hestiyê vertebral de vegotin. Guhertinên celebê Modîk I li ser rêzikên T1-girankirî (T1W) hîpointens û li ser rêzikên T2-girankirî (T2W) hîperintens in. Ev lezyon plakayên dawî yên şikestî û tevna granulasyona damarî ya cîran di hestiyê hestî de eşkere dike. Guhertinên celebê Modîk II li ser her du rêzikên T1W û T2W sînyala bilind nîşan didin. Di vê celebê lezyonê de, hilweşandina plakaya dawî dikare were dîtin, û her weha guheztina rûn a hîstolojîk a hestiyê hestiyê cîran. Guhertinên celebê Modîk III di rêzikên T1W û T2W de sînyala kêm nîşan didin. Lezyonên sklerozîk ên ku bi plakayên dawî re têkildar in hatine dîtin6. MC wekî nexweşiyeke patolojîk a stûnê tê hesibandin û bi gelek nexweşiyên dejenerasyonê yên stûnê ve girêdayî ye7,8,9.
Bi berçavgirtina daneyên berdest, çend lêkolînan têgihiştinên berfireh li ser etiolojî û mekanîzmayên patolojîk ên MC peyda kirine. Albert û hevkarên wî pêşniyar kirin ku MC dibe ku ji ber herniya dîskê çêbibe8. Hu û hevkarên wî MC bi dejenerasyona giran a dîskê ve girê dan10. Kroc têgeha "çirandina dîska navxweyî" pêşniyar kir, ku dibêje trawmaya dîskê ya dubare dibe ku bibe sedema mîkroçirandinên di plakaya dawîn de. Piştî çêbûna şikestinê, hilweşandina plakaya dawîn ji hêla navika pulposus (NP) ve dibe ku bersivek otoîmmûn çêbike, ku ev jî dibe sedema pêşveçûna MC11. Ma û hevkarên wî nêrînek wekhev parve kirin û ragihandin ku otoîmmûnîteya ji hêla NP ve hatî çêkirin rolek sereke di patogeneza MC12 de dilîze.
Xaneyên sîstema parastinê, bi taybetî lîmfosîtên alîkar ên T yên CD4+, di patogeneza otoîmmûnîteyê de roleke girîng dilîzin13. Komeke Th17 a ku vê dawiyê hatiye keşifkirin, sîtokîna proînflamatuar IL-17 hildiberîne, derbirîna kemokîn pêş dixe, û xaneyên T di organên zirardar de teşwîq dike ku IFN-γ14 hilberînin. Xaneyên Th2 jî di patogeneza bersivên parastinê de roleke bêhempa dilîzin. Derbirîna IL-4 wekî xaneya Th2 ya nûner dikare bibe sedema encamên giran ên îmmunopatolojîk15.
Her çend gelek lêkolînên klînîkî li ser MC16,17,18,19,20,21,22,23,24 hatine kirin jî, hîn jî kêmasiya modelên ceribandinê yên heywanan ên guncaw hene ku dikarin pêvajoya MC-ê teqlîd bikin ku pir caran di mirovan de çêdibe û dikarin ji bo lêkolîna etiolojiyê an dermankirinên nû yên wekî terapiya hedefgirtî werin bikar anîn. Heta niha, tenê çend modelên heywanan ên MC-ê hatine ragihandin ku mekanîzmayên patolojîk ên bingehîn lêkolîn dikin.
Li ser bingeha teoriya otoîmmûn a ku ji hêla Albert û Ma ve hatî pêşniyar kirin, vê lêkolînê modelek MC ya kergoşkê ya hêsan û dubarekirî ava kir bi rêya ototransplantkirina NP li nêzî plakaya dawiya movika qulkirî. Armancên din jî çavdêriya taybetmendiyên hîstolojîk ên modelên heywanan û nirxandina mekanîzmayên taybetî yên NP di pêşveçûna MC de ne. Ji bo vê armancê, em teknîkên wekî biyolojiya molekulî, MRI, û lêkolînên hîstolojîk bikar tînin da ku pêşveçûna MC lêkolîn bikin.
Du kêvroşk di dema emeliyatê de ji ber xwînrijandinê mirin, û çar kêvroşk jî di dema anesteziyê de di dema MRI de mirin. 48 kêvroşkên mayî sax man û piştî emeliyatê ti nîşanên reftarî an neurolojîk nîşan nedan.
MRI nîşan dide ku şîddeta sînyala tevna çandî di qulên cuda de cuda ye. Şîddeta sînyala laşê movika L5 di koma NPE de di hefteyên 12, 16 û 20an de piştî danînê hêdî hêdî guherî (rêzika T1W sînyala kêm nîşan da, û rêza T2W sînyala tevlihev û sînyala kêm nîşan da) (Wêne 1C), di heman demê de xuyangên MRI yên du komên din ên beşên çandî di heman heyamê de bi nisbetî sabît man (Wêne 1A, B).
(A) MRI-yên nûner ên rêze-demî yên stûna lumbar a kergoşkê di 3 xalên demê de. Di wêneyên koma operasyona sexte de ti anormaliyên sînyalê nehatin dîtin. (B) Taybetmendiyên sînyala laşê movikan di koma ME de dişibin yên di koma operasyona sexte de, û di cîhê bicihkirinê de di demê re tu guherînek girîng a sînyalê nayê dîtin. (C) Di koma NPE de, sînyala nizm di rêza T1W de bi zelalî xuya dike, û sînyala tevlihev û sînyala nizm di rêza T2W de bi zelalî xuya dikin. Ji serdema 12-hefteyan heya serdema 20-hefteyan, sînyalên bilind ên sporadîk ên li dora sînyalên nizm di rêza T2W de kêm dibin.
Di koma NPE de li cihê çandina laşê movikan de hîperplaziya hestî ya eşkere tê dîtin, û hîperplaziya hestî di navbera hefteyên 12 û 20an de li gorî koma NPE zûtir çêdibe (Wêne 2C), di laşên movikan ên modelkirî de guherînek girîng nayê dîtin; koma Sham û koma ME (Wêne 2C) (2A,B).
(A) Rûyê laşê movikan li beşa çandinî pir nerm e, qul baş baş dibe, û di laşê movikan de hîperplazî tune. (B) Şêweyê cihê çandinî di koma ME de dişibihe ya di koma emeliyata sexte de, û di xuyangê cihê çandinî de bi demê re guherînek berbiçav tune. (C) Hîperplaziya hestî li cihê çandinî di koma NPE de çêbû. Hîperplaziya hestî bi lez zêde bû û heta bi rêya dîska navbera movikan ber bi laşê movikan ê dijber ve dirêj bû.
Analîza hîstolojîk agahdariyên berfirehtir li ser çêbûna hestî peyda dike. Wêne 3 wêneyên beşên piştî emeliyatê yên bi H&E hatine boyaxkirin nîşan dide. Di koma emeliyata sexte de, kondrosît baş rêz bûbûn û zêdebûna hucreyan nehat tespîtkirin (Wêne 3A). Rewşa di koma ME de dişibiya ya di koma emeliyata sexte de (Wêne 3B). Lêbelê, di koma NPE de, hejmareke mezin ji kondrosîtan û zêdebûna hucreyên mîna NP li cihê çandinê hatin dîtin (Wêne 3C);
(A) Trabekul li nêzîkî plakaya dawiyê têne dîtin, kondrosît bi rêkûpêk hatine rêzkirin, mezinahiya û şiklê şaneyê yekreng e û zêdebûn tune ye (40 caran). (B) Rewşa cihê çandinê di koma ME de dişibihe ya koma sexte. Trabekul û kondrosît têne dîtin, lê li cihê çandinê zêdebûnek eşkere tune ye (40 caran). (B) Diyar e ku kondrosît û şaneyên NP-wekî bi girîngî zêde dibin, û şekil û mezinahiya kondrosîtan ne yekreng e (40 caran).
Derbirîna mRNA ya înterleukin 4 (IL-4), mRNA ya înterleukin 17 (IL-17), û mRNA ya înterferon γ (IFN-γ) di her du komên NPE û ME de hat dîtin. Dema ku astên derbirîna genên hedef hatin berhevdan, derbirîna genên IL-4, IL-17, û IFN-γ di koma NPE de li gorî yên koma ME û koma operasyona sexte bi girîngî zêde bû (Wêne 4) (P < 0.05). Li gorî koma operasyona sexte, astên derbirîna IL-4, IL-17, û IFN-γ di koma ME de tenê hinekî zêde bûn û negihîştin guherîna statîstîkî (P > 0.05).
Derbirîna mRNA ya IL-4, IL-17 û IFN-γ di koma NPE de meyleke pir bilindtir nîşan da ji yên di koma operasyona sexte û koma ME de (P < 0.05).
Berevajî vê, astên îfadeyê di koma ME de cûdahiyek girîng nîşan nedan (P> 0.05).
Analîza Western blot bi karanîna antîkorên bazirganî yên li dijî IL-4 û IL-17 hate kirin da ku qaliba îfadeya mRNA ya guhertî were piştrast kirin. Wekî ku di Wêneyên 5A,B de tê xuyang kirin, li gorî koma ME û koma operasyona sexte, asta proteîna IL-4 û IL-17 di koma NPE de bi girîngî zêde bû (P < 0.05). Li gorî koma operasyona sexte, asta proteîna IL-4 û IL-17 di koma ME de jî negihîşt guhertinên girîng ên îstatîstîkî (P> 0.05).
(A) Asta proteîna IL-4 û IL-17 di koma NPE de ji ya koma ME û koma placebo bi girîngî bilindtir bû (P < 0.05). (B) Hîstograma Western blot.
Ji ber hejmara sînorkirî ya nimûneyên mirovî yên ku di dema emeliyatê de hatine wergirtin, lêkolînên zelal û berfireh li ser patogeneza MC hinekî dijwar in. Me hewl da ku modelek heywanî ya MC ava bikin da ku mekanîzmayên wê yên potansiyel ên patolojîk lêkolîn bikin. Di heman demê de, nirxandina radyolojîk, nirxandina hîstolojîk û nirxandina biyolojîkî ya molekulî hatin bikar anîn da ku rêça MC-ya ku ji hêla otografta NP ve hatî çêkirin bişopînin. Di encamê de, modela çandina NP bû sedema guherînek hêdî hêdî di şîdeta sînyalê de ji xalên demê yên 12-hefte heta 20-hefte (sînyala nizm a tevlihev di rêzikên T1W û sînyala nizm di rêzikên T2W de), ku guhertinên tevnê nîşan dide, û nirxandinên hîstolojîk û biyolojîkî yên molekulî encamên lêkolîna radyolojîk piştrast kirin.
Encamên vê ceribandinê nîşan didin ku guhertinên dîtbarî û hîstolojîk li cihê binpêkirina laşê movikan di koma NPE de çêbûne. Di heman demê de, îfadeya genên IL-4, IL-17 û IFN-γ, û her weha IL-4, IL-17 û IFN-γ hatin dîtin, ku nîşan dide ku binpêkirina tevna otolog a navika pulposus di laşê movikan de dibe sedema rêze guhertinên sînyal û morfolojîk. Bi hêsanî tê dîtin ku taybetmendiyên sînyala laşên movikan ên modela heywanan (sînyala nizm di rêza T1W de, sînyala tevlihev û sînyala nizm di rêza T2W de) pir dişibin yên şaneyên movikan ên mirovan, û taybetmendiyên MRI jî çavdêriyên hîstolojî û anatomiya giştî piştrast dikin, ango guhertinên di şaneyên laşê movikan de pêşverû ne. Her çend bersiva iltîhaba ji ber trawmaya akût dibe ku di demek kurt de piştî punksiyonê xuya bibe jî, encamên MRI nîşan dan ku guhertinên sînyalê yên ku pêşverû zêde dibin 12 hefte piştî punksiyonê xuya bûn û heta 20 hefteyan bêyî nîşanên başbûn an vegerandina guhertinên MRI berdewam kirin. Ev encam nîşan didin ku NP-ya vertebral a otolog rêbazek pêbawer e ji bo damezrandina MV-ya pêşverû di kergoşan de.
Ev modela qulkirinê jêhatîbûn, dem û hewldana cerrahî ya têrker hewce dike. Di ceribandinên destpêkê de, veqetandin an teşwîqkirina zêde ya avahiyên ligamentoz ên paravertebral dibe ku bibe sedema çêbûna osteofîtên vertebral. Divê baldar be ku dîskên cîran zirarê nedin an aciz nekin. Ji ber ku divê kûrahiya penetrasyonê were kontrol kirin da ku encamên domdar û dubarekirî werin bidestxistin, me bi destan bi qutkirina qalikê derziyek 3 mm dirêj pêvekek çêkir. Bikaranîna vê pêvekê kûrahiya qulkirinê ya yekreng di laşê vertebral de misoger dike. Di ceribandinên destpêkê de, sê cerrahên ortopedîk ên ku beşdarî operasyonê bûn dîtin ku derziyên 16-gauge ji derziyên 18-gauge an rêbazên din hêsantir têne xebitandin. Ji bo dûrketina ji xwînrijandina zêde di dema qulkirinê de, ragirtina derziyê ji bo demekê dê qulikek danînê ya guncantir peyda bike, ku pêşniyar dike ku astek diyarkirî ya MC dikare bi vî rengî were kontrol kirin.
Her çend gelek lêkolînan MC hedef girtine jî, di derbarê etiolojî û patogeneza MC25,26,27 de hindik tişt têne zanîn. Li gorî lêkolînên me yên berê, me dît ku otoîmmûnîtî di çêbûn û pêşveçûna MC12 de roleke sereke dilîze. Vê lêkolînê îfadeya hejmarî ya IL-4, IL-17, û IFN-γ, ku rêyên sereke yên cûdakirina hucreyên CD4+ piştî teşwîqkirina antîjenê ne, lêkolîn kir. Di lêkolîna me de, li gorî koma neyînî, koma NPE îfadeya IL-4, IL-17, û IFN-γ bilindtir bû, û asta proteîna IL-4 û IL-17 jî bilindtir bû.
Ji hêla klînîkî ve, derbirîna mRNA ya IL-17 di hucreyên NP yên nexweşên bi herniasyona dîskê de zêde dibe28. Asta derbirîna IL-4 û IFN-γ ya zêde di modelek herniasyona dîskê ya ne-zextker a akût de jî li gorî kontrolên saxlem hate dîtin29. IL-17 roleke sereke di iltîhaba, birîndarbûna tevnê di nexweşiyên otoîmmûn de dilîze30 û bersiva parastinê ya ji bo IFN-γ31 zêde dike. Zirara tevnê ya bi navbeynkariya IL-17 ya zêde di mişkên MRL/lpr32 û mişkên hesas ên otoîmmûnî de hatiye ragihandin33. IL-4 dikare derbirîna sîtokînên proînflamatuar (wek IL-1β û TNFα) û çalakkirina makrofajê asteng bike34. Hat ragihandin ku derbirîna mRNA ya IL-4 di koma NPE de li gorî IL-17 û IFN-γ di heman demê de cûda bû; Derbirîna mRNA ya IFN-γ di koma NPE de ji ya di komên din de bi girîngî bilindtir bû. Ji ber vê yekê, hilberîna IFN-γ dibe ku navbeynkarek bersiva înflamatuar be ku ji hêla navberkirina NP ve hatî çêkirin. Lêkolînan nîşan dane ku IFN-γ ji hêla gelek cureyên şaneyan ve tê hilberandin, di nav de şaneyên alîkar ên tîpa 1 ên çalakkirî, şaneyên kujer ên xwezayî, û makrofaj35,36, û sîtokîneke sereke ya pro-înflamatuar e ku bersivên parastinê pêş dixe37.
Ev lêkolîn nîşan dide ku bersiva otoîmmûn dibe ku di çêbûn û pêşveçûna MC de beşdar be. Luoma et al. dîtin ku taybetmendiyên sînyala MC û NP-yên berbiçav di MRI-yê de dişibin hev, û her du jî di rêza T2W de sînyala bilind nîşan didin38. Hin sîtokîn hatine piştrast kirin ku bi çêbûna MC-yê re têkildar in, wek IL-139. Ma et al. pêşniyar kirin ku derketina jor an jêr a NP-yê dibe ku bandorek mezin li ser çêbûn û pêşveçûna MC12 bike. Bobechko40 û Herzbein et al.41 ragihandin ku NP tevnek îmmunotolerans e ku ji jidayikbûnê ve nikare bikeve gera damarî. Derketina NP laşên biyanî dixin nav dabînkirina xwînê, bi vî rengî reaksiyonên otoîmmûn ên herêmî navbeynkar dikin42. Reaksiyonên otoîmmûn dikarin hejmareke mezin ji faktorên îmmunolojîk teşwîq bikin, û dema ku ev faktor bi berdewamî li ser tevnan têne danîn, ew dikarin bibin sedema guhertinan di sînyalan de43. Di vê lêkolînê de, zêdeîfadekirina IL-4, IL-17 û IFN-γ faktorên îmmunolojîk ên tîpîk in, ku têkiliya nêzîk di navbera NP û MC-yan de bêtir îspat dikin44. Ev modela heywanan derbasbûna NP û ketina nav plakaya dawiyê baş teqlîd dike. Vê pêvajoyê bandora otoîmmûnîteyê li ser MC bêtir eşkere kir.
Wekî ku tê hêvîkirin, ev modela heywanan platformek gengaz ji me re peyda dike da ku em MC lêkolîn bikin. Lêbelê, ev model hîn jî hin sînorkirinên wê hene: yekem, di qonaxa çavdêriya heywanan de, hin kêvroşkên qonaxa navîn hewce ne ku ji bo ceribandina histolojîk û biyolojiya molekulî werin kuştin, ji ber vê yekê hin heywan bi demê re "ji karanînê derdikevin". Ya duyemîn, her çend sê xalên demê di vê lêkolînê de hatine danîn jî, mixabin, me tenê yek celeb MC (guherîna celebê I ya Modic) model kir, ji ber vê yekê ne bes e ku pêvajoya pêşkeftina nexweşiya mirovan temsîl bike, û ji bo ku hemî guhertinên sînyalê çêtir werin dîtin, divê bêtir xalên demê werin danîn. Ya sêyemîn, guhertinên di avahiya tevnê de bi rastî jî dikarin bi boyaxkirina histolojîk bi zelalî werin nîşandan, lê hin teknîkên taybetî dikarin guhertinên mîkrostrukturî di vê modelê de çêtir eşkere bikin. Mînakî, mîkroskopiya ronahiya polarîzekirî ji bo analîzkirina çêbûna fîbrokartilajê di dîskên navvertebral ên kêvroşk de hate bikar anîn45. Bandorên demdirêj ên NP li ser MC û plakaya dawiyê hewceyê lêkolînek bêtir in.
Pêncî û çar kêvroşkên spî yên nêr ên Zelanda Nû (giraniya wan nêzîkî 2.5-3 kg, temenê wan 3-3.5 meh) bi awayekî rasthatî li koma emeliyata sexte, koma çandina masûlkeyan (koma ME) û koma çandina rehê demaran (koma NPE) hatin dabeşkirin. Hemû prosedurên ceribandinê ji aliyê Komîteya Etîkê ya Nexweşxaneya Tianjin ve hatin pejirandin, û rêbazên ceribandinê bi tevahî li gorî rêbernameyên pejirandî hatin kirin.
Hin başkirin di teknîka neştergeriyê ya S. Sobajima 46 de hatine kirin. Her kêvroşk di pozîsyona razayî ya alî de hat danîn û rûyê pêşîn ê pênc dîskên navvertebral ên lumbar (IVD) yên li pey hev bi karanîna nêzîkatiya retroperîtonal a posterolateral hat eşkerekirin. Her kêvroşkek anesteziya giştî (20% urethane, 5 ml/kg bi rêya damara guh) hat dayîn. Birînek çerm a dirêj ji qiraxa jêrîn a riban heta qiraxa pelvisê, 2 cm ventral heta masûlkeyên paravertebral hat kirin. Stûna anterolateral a rastê ji L1 heta L6 bi veqetandina tûj û bêserûber a tevna binçerm a jorîn, tevna retroperîtonal û masûlkeyan hat eşkerekirin (Wêne 6A). Asta dîskê bi karanîna qiraxa pelvisê wekî nîşaneyek anatomîk ji bo asta dîska L5-L6 hat destnîşankirin. Derziyek punksiyonê ya 16-gauge bikar bînin da ku qulikek li nêzî plakaya dawiya vertebra L5 heta kûrahiya 3 mm bikolin (Wêne 6B). Ji bo kişandina navika vertebral a L1-L2 (Wêne 6C) şîrîngeke 5 ml bikar bînin. Li gorî hewcedariyên her komê, navika pulposus an masûlkeyê derxînin. Piştî ku qulika qulkirî kûr dibe, dirûnên mijandinê li ser fascia kûr, fascia rûvî û çerm têne danîn, bi baldarî tê dayîn ku di dema emeliyatê de zirarê negihîje tevna perîostal a laşê vertebral.
(A) Dîska L5-L6 bi rêbaza paş-alî ya retroperîtonî tê derxistin. (B) Derziyeke 16-gauge bikar bînin da ku nêzîkî plakaya dawiya L5 qulikek çêbikin. (C) MF-yên otolog têne berhevkirin.
Anesteziya giştî bi 20% urethane (5 ml/kg) bi rêya damara guh hate dayîn, û radyografiyên stûna lumbar di hefteyên 12, 16 û 20an de piştî emeliyatê hatin dubarekirin.
Di hefteyên 12, 16 û 20an de piştî emeliyatê, kêvroşk bi derzîkirina navmasûlkeyî ya ketamîn (25.0 mg/kg) û sodyûm pentobarbital a damarî (1.2 g/kg) hatin qurbanîkirin. Ji bo analîza hîstolojîk tevahiya stûnê hate derxistin û analîza rastîn hate kirin. Ji bo tespîtkirina guhertinên di faktorên parastinê de transkrîpsiyona berevajî ya hejmarî (RT-qPCR) û Western blotting hatin bikar anîn.
Muayeneyên MRI li ser kêvroşkan bi karanîna mıknatîsek klînîkî ya 3.0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) ku bi wergirek kelekek lingê ya ortogonal ve hatî sazkirin, hatin kirin. Kêvroşk bi rêya damara guh bi 20% urethane (5 mL/kg) hatin anestez kirin û dûv re di nav mıknatîsê de bi herêma lumbar a li ser kelekek rûberî ya dorhêl a bi qûtra 5 înç (GE Medical Systems) hatin danîn. Wêneyên lokalîzatorê yên T2-giraniya koronal (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) hatin girtin da ku cihê dîska lumbar ji L3-L4 heta L5-L6 were destnîşankirin. Perçeyên T2-giraniya plana sagittal bi mîhengên jêrîn hatin girtin: rêza spin-echo ya bilez bi dema dubarekirinê (TR) 2200 ms û dema echo (TE) 70 ms, matrîks; qada dîtbarî 260 û heşt teşwîq; Qalindahiya birrînê 2 mm bû, valahî 0.2 mm bû.
Piştî ku wêneya dawî hat kişandin û kêvroşkê dawî hat kuştin, dîskên sexte, yên di masûlkeyan de hatine bicihkirin û NP ji bo muayeneya hîstolojîk hatin derxistin. Tevn ji bo hefteyekê di formalîna tamponkirî ya bêalî ya %10 de hatin sabît kirin, bi asîda etîlendîyamînetetraasetîk hatin dekalsîfîkasyon kirin û bi parafînê hatin perçekirin. Blokên tevnê di parafînê de hatin bicihkirin û bi karanîna mîkrotomê bûn beşên sagîtal (5 μm stûr). Beş bi hematoksîlîn û eozînê (H&E) hatin boyaxkirin.
Piştî berhevkirina dîskên navbera vertebrayan ji kêvroşkên di her komê de, RNAya giştî bi karanîna stûnek UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., China) li gorî rêwerzên çêker û pergala transkrîpsiyona berevajî ya ImProm II (Promega Inc., Madison, WI, USA) hate derxistin. Transkrîpsiyona berevajî hate kirin.
RT-qPCR li gorî rêwerzên çêker bi karanîna Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) û SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) hate kirin. Qebareya reaksiyona PCR 20 μl bû û 1.5 μl cDNA ya şilkirî û 0.2 μM ji her primer tê de hebû. Primer ji hêla OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) ve hatine sêwirandin û ji hêla Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Çîn) ve hatine çêkirin (Tabloya 1). Mercên çerxeya germî yên jêrîn hatin bikar anîn: gava destpêkê ya çalakkirina polîmerazê li 94°C ji bo 2 hûrdeman, dûv re 40 çerxên 15 saniyeyî li 94°C ji bo denaturasyona şablonê, germkirin ji bo 1 hûrdem li 60°C, dirêjkirin û fluoresans. Pîvandin ji bo 1 hûrdem li 72°C hatin kirin. Hemî nimûne sê caran hatin zêdekirin û nirxa navînî ji bo analîza RT-qPCR hate bikar anîn. Daneyên amplîfîkasyonê bi karanîna FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) hatin analîzkirin. Îfadeya genên IL-4, IL-17, û IFN-γ li gorî kontrola endojîn (ACTB) hat normalîzekirin. Astên îfadeya nisbî ya mRNA-ya hedef bi karanîna rêbaza 2-ΔΔCT hatin hesabkirin.
Proteîna tevahî ji tevnan bi karanîna homojenîzatorekî tevnan di tampona lîzê ya RIPA de (ku kokteylek astengkerê proteaz û fosfatazê dihewîne) hate derxistin û dûv re di 13,000 rpm de ji bo 20 hûrdeman di 4°C de hate santrifujkirin da ku bermahiyên tevnan werin rakirin. Ji bo rakirina bermahiyên tevnan, pêncî mîkrogram proteîn li her rêzê hate barkirin, bi 10% SDS-PAGE veqetiya, û dûv re veguheztin nav membrana PVDF. Astengkirin di şîrê hişk ê bêrûn ê 5% di salona bi tampona Tris (TBS) de ku 0.1% Tween 20 dihewîne ji bo 1 demjimêran di germahiya odeyê de hate kirin. Membran bi antîkorê seretayî yê dij-dekorînê kêvroşk (1:200 tê şilkirin; Boster, Wuhan, Çîn) (1:200 tê şilkirin; Bioss, Pekîn, Çîn) bi şev di 4°C de hate înkubasyonkirin û di rojên duyemîn de reaksiyon nîşan da; bi antîkorê duyemîn (îmmunoglobulin G ya dij-kergoşkê bizinê bi rêjeya 1:40,000) bi peroksîdaza horseradish (Boster, Wuhan, Çîn) re ji bo 1 saetê di germahiya odeyê de hate tevlihevkirin. Sînyalên Western blot bi zêdebûna kîmylumînesansê li ser membrana kîmylumînesansê piştî tîrêjên X hatin tespîtkirin. Ji bo analîza densitometrîk, blot bi karanîna nermalava BandScan hatin şopandin û hejmartin û encam wekî rêjeya îmmunoreaktîvîteya gena hedef bi îmmunoreaktîvîteya tubulînê re hatin îfadekirin.
Hesabên îstatîstîkî bi karanîna pakêta nermalava SPSS16.0 (SPSS, DYA) hatin kirin. Daneyên ku di dema lêkolînê de hatine berhevkirin wekî navînî ± devîasyona standard (navîn ± SD) hatin îfade kirin û bi karanîna analîza guherbariya pîvandina dubarekirî ya yekalî (ANOVA) hatin analîz kirin da ku cûdahiyên di navbera her du koman de werin destnîşankirin. P < 0.05 wekî girîng a îstatîstîkî hate hesibandin.
Ji ber vê yekê, avakirina modelek heywanî ya MC bi çandina NP-yên otolog di laşê vertebral de û pêkanîna çavdêriya makroanatomîkî, analîza MRI, nirxandina hîstolojîk û analîza biyolojîkî ya molekulî dikare bibe amûrek girîng ji bo nirxandin û têgihîştina mekanîzmayên MC-ya mirovan û pêşxistina mudaxeleyên dermankirinê yên nû.
Çawa vê gotarê binav bikin: Han, C. û yên din. Modelek heywanî ya guhertinên Modic bi çandina otolog a nucleus pulposus di hestiyê subkondral ê stûna lumbar de hate damezrandin. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., û Boos, N. Wênekêşiya rezonansa manyetîkî ya stûna lumbar: belavbûna hernîasyon û ragirtina dîskê, zexta rehê demarî, anormaliyên plakaya dawiyê, û osteoartrîta movika facetê di dilxwazên bê nîşanan de. rêje. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, û Leboeuf-Eed, K. Guhertinên Modic û têkiliya wan bi dîtinên klînîkî re. Kovara Spineya Ewropî: weşana fermî ya Civaka Spineya Ewropî, Civaka Ewropî ya Deformîteya Spineyê, û Civaka Ewropî ji bo Lêkolîna Spineya Servîkal 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., û yên din. Guhertinên Modîk di plakayên dawî yên vertebra lumbar de: belavbûn û têkiliya bi êşa pişta jêrîn û siyatîka di karkerên mêr ên temen-navîn de. Spine 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., û Dalinka, M. MRI ya guhertinên mêjiyê hestî yên nêzîkî plakaya dawî di nexweşiya dejenerasyonê ya stûna lumbar de. AJR. Kovara Amerîkî ya Radyolojiyê 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, û Carter, JR Nexweşiya dîska dejenerasyonê: nirxandina guhertinên mêjiyê vertebral bi MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, û Carter, JR Wênekirina nexweşiya dîska dejenerasyonê. Radyolojî 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, û yên din. Pêşbînkerên plakaya dawî ya neovertebral (Modic) guhertinên di nifûsa giştî de nîşan didin. Kovara Spineya Ewropî: Weşana Fermî ya Civaka Spineya Ewropî, Civaka Ewropî ya Deformîteya Spineyê, û Civaka Ewropî ji bo Lêkolîna Spineya Servîkal, Beşa 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB û Mannisch, K. Guhertinên Modic piştî herniasyona dîska lumbar. Kovara Stûna Ewropî: Weşana Fermî ya Civaka Stûna Ewropî, Civaka Ewropî ya Deformîteya Stûnê û Civaka Ewropî ji bo Lêkolîna Stûna Servîkal 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., û Kaapa, E. Guhertinên Modic ên celeb I dikarin dejenerasyona dîska deformasyonê ya bilez pêşveçûyî pêşbînî bikin: lêkolînek pêşerojî ya 1-salî. Kovara Spî ya Ewropî 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ û Fan, SW Guhertinên Modic: sedemên gengaz û beşdarbûna di dejenerasyona dîska lumbar de. Hîpoteza Pizîşkî 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Şikestina hundirîn a dîskê. Pirsgirêkên prolapsa dîskê di 50 salan de. Stûn (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
Dema weşandinê: 13ê Kanûna Pêşîn a 2024an