Spas ji bo serdana xwezayê.com. Guhertoya geroka ku hûn bi karanîna piştgiriya CSS-ê sînorkirî ye. Ji bo encamên çêtirîn, em pêşniyar dikin ku hûn guhertoyek nû ya geroka xwe bikar bînin (an jî moda lihevhatinê li Internet Explorer bikar bînin). Di vê navberê de, da ku piştgiriya domdar bicîh bikin, em bêyî stûn û javascript malperê nîşanî malperê dikin.
Pêşveçûna mîkrobiyê di birînan de bi gelemperî xwe wekî biofilms diyar dike, ku têkilî bi başbûnê û dijwar e. Kincên zîv ên nû îdîa dikin ku enfeksiyonên birînê bi şertê şer bikin, lê bandorên wan yên antîbiofilm û bandorên başkirina serbixwe bi gelemperî ne diyar in. Bikaranîna li Vitro û di Modelên Vivo Biofilm de Modelên Staphylococcus Aureus û Pseudomonas Aeruginosa, em bandora AG1 + ion-ion-hilberîner ragihand; AG1 + Kincên ku tê de etylenediaminetetraacetic acid û benzetonium chloride (AG1 + / edta / BC), û kincên ku nitratên zîvîn (AG Oxylesal) hene. , ku AG1 +, AG2 + û AG3 + ion ji bo şerkirina biofilm û bandora wê li ser başkirinê şer dike. AG1 + Cilûbergên li ser biofilm li Vitro û li Mişk (C57BL / 6J) bandorên kêmtirîn bandorên kêmtirîn hebûn (C57BL / 6J). Berevajî vê yekê, SALTS AND SALTS AND AG1 + / EDTA / BC Cilûbergên biofilms li Vitro kêm kêm kir û kêmasiyek girîng a li ser specên bakterî û EPS-ê di Biofilmsên birîna Mouse de nîşan da. Van kincan li ser başkirina birînên biofilm-infited û neofilm-inofilm-inofilm-inofilm-enfeksiyonan xwedan bandorên oksomited li ser reepithelialization, mezinahiya birînê û enflasyonê li gorî kontrolkirina derman û kincên din ên zîvîn hene. Taybetmendiyên fîzîkolojî yên cuda yên kincên zîvîn dikarin li ser birînên biofilm û başkirinê bandorên cûda hebin, û divê ev were hesibandin dema ku hûn ji bo dermankirina birînên biofilm-birînên biofilm-enfeksiyonê hilbijêrin.
Birînên kronîk wekî "birînên ku bi rêça normal ve di qonaxên normal ên qenckirina bi rêkûpêk û demkî ve diçin" 1. Birînên kronîk ji bo nexweş û pergala tenduristiyê barê psîkolojîk, civakî û aborî ava dikin. Salane NHS Li ser dermankirina birînên dermankirinê û komeleyên têkildar di sala 2017-182 de li 8,3 mîlyar dolar tê texmîn kirin. Di heman demê de birînên kronîk jî di Dewletên Yekbûyî de pirsgirêkek zextan in, digel Medicare lêçûnên salane yên dermankirina nexweşan bi birînên bi birînên $ 28.1- $ 96.8 mîlyar dolar.
Infeksiyonê faktorek girîng e ku pêşî li başkirina birînê digire. Infeksiyonên bi gelemperî wekî biofilms têne eşkere kirin, ku di% 78-ê birînên kronîk ên ne saxlem de ne. Forma biofilms dema ku mîkrojenî li ser rûyan ve girêdayî ye, wek birînên birînan, û dikarin bi hev re bibin alîkar ku ji bo avakirina polîmer (EPS) -Producing pêk bînin. Biofilm biofilm bi bersivdayîna enfeksiyonê ya zêdebûna zirarê tûjtir re têkildar e, ku dikare dereng bike an pêşî lê derman bike. Zêdebûna zirara tansiyonê dibe ku ji ber zêdebûna çalakiya metal matrix meteloke, kolagenase, elastase û reaktîf oksiyonan. Ji xeynî vê yekê, hucreyên enflasyonê û biofilms bixweberên oksîjenê ne û ji ber vê yekê dikare bibe sedema hîpoxya ya herêmî, hucreyên hilweşandî yên oksîjena girîng a ji bo tamîrkirina tansiyonê ya bi bandor.
Biofilms mature pir li gorî nûnerên antîimicrobial in, ku ji stratejiyên agirbestî hewce ne ku enfeksiyonên biofilm kontrol bikin, wek dermankirina mekanîkî li dû dermankirina antimicrobial bi bandor. Ji ber ku biofilms dikarin nûjenkirin, antimicrobên bi bandor dikarin xetera ji nû ve avakirina piştî debêjên bijîjkî kêm bikin.
Zîv di zêdebûna kincên antîimicrobî de tê bikar anîn û bi gelemperî wekî dermankirina yekemîn ji bo birînên enfeksiyonê yên kronîk tê bikar anîn. Gelek kincên zîvîn ên bazirganî hene, her yek jî pêkve, berhevok, tevlihevî, û matrixê ya bingehîn heye. Pêşkeftinên li Armbandên Zîvîn rê li ber pêşkeftina çekên zîvîn ên nû bûne. Forma metallîk ya zîv (ag0) inert e; Ji bo ku bigihîjin bandora antîimicrobial, divê ew elektronek winda bike da ku bi avakirina ionic zîv (AG1 +) winda bike. Kincên zîvî yên kevneşopî kompleksên zîvîn an zîvê metallîk hene ku, dema ku li ser liquidê tê derxistin, bi avakirina AG1 + ion. Van AG1 + ions bi hucreya bakterî re reaksiyon dikin, ku elektronên ji pêkhateyên strukturî an pêvajoyên krîtîk ên ku ji bo saxbûnê hewce ne hewce ne. Teknolojiya Patentkirî rê li ber pêşkeftina kompleksek nû ya zîv, AG oxysaltên (Nitrate Silver, Ag7no11), ku di nav kincên birînê de tê de ye. Berevajî zîvê kevneşopî, dekomasyona salixên oksîjenê bi valahiya bilindtir bi valahiya jorîn (AG1 +, AG2 + û AG3 +) hilberîne. Li Lêkolînên Vitro destnîşan kir ku hebên zîv ên oksînkirî ji single ion ion (AG1 +) li dijî bakteriya pathogenic in Celebek nû ya kincê zîvîn, bi navgîniya etylenediaminetetraacetic (EDTA) û BenzetHonium Chloride (BC) tê ragihandin û bi vî rengî li ser biofilm ve girêdide. Van teknolojiyên nû yên zîvîn awayên nû pêşkêş dikin da ku biofilmên birînê armanc bikin. Lêbelê, bandora van antimicrobials li ser hawîrdora birînê û başkirina enfeksiyonê girîng e ku ew pêbawer bikin ku ew jîngeheke birêkûpêk a birêkûpêk an dermankirina dereng çêdikin. Pirsgirêkên li ser cytotoxiyeta Vitro ya Vitro bi gelek kincên zîv10,11 hatine ragihandin. Lêbelê, di cittotoxasyona Vitro de di toksiya Vivo de nehatiye wergerandin, û çend AG1 + Cilûbergên Profileek baş a ewlehiyê12 destnîşan kirin.
Li vir, me li ser pêlavên kevir ên karboxymethylcellululose ku formulên zîv ên nû yên li dijî birîna biofilm in vitro û di Vivo de hene. Wekî din, bandorên van kincan li bersivên bêserûber û başkirina enfeksiyonê ya serbixwe hatin nirxandin.
Hemî kincên bikar anîn bi bazirganî peyda bûn. 3M Kerracel Gel Dressing (3m, Knutsford, UK) 100% karboximrobial e Sê kincên zîv ên antimicrobial hatin nirxandin, Namely 3M Kerracel Ag Dressing (3M, Knutsford, UK), ku tê de 1.7 WT%. oksîjen zîv salona zîv (AG7NO11) di bilindtirîn zîvê zîvîn (AG1 +, AG2 + û AG3 +). Di dema dekomasyona AG7NO11, AG1 +, AG2 + û AG3 + ion de bi navgînek 1: 2: 4 têne damezirandin. Aquacel AG Extra 1,2% Silver Chloride (AG1 +) (Konfask, Deeside, uk)
Stranên ku di vê lêkolînê de hatine bikar anîn, pseudomonas aeruginosa nctc 10781 (Tenduristiya giştî England, Salisbury) û Staphylococcus Aureus NCTC 6571
Bakterî li şevê li Muller-Hinton Broth (Oxoid, Altrincham, UK) hatin mezin bûn. Thendî çanda şevê hate dilpakî 1: 100 li Mueller-Hinton Broth û 200 μL li ser sterile 0.2 μM Whatman CycLopore ). ) Damezrandina biyolojiya kolonyal li 37 ° C ji bo 24 demjimêran. Van biofilmên kolonyal ji bo tîrêjê logarithmîk hatin ceribandin.
Kincê di nav 3 cm2 parçeyên katjimêr û pêş-tîrêjê de bi ava deionized sterilî qut bikin. Bandor li ser biyofilm ya koloniyê li ser plakaya AGAR bicîh bikin. Her 24 ha biofilm rakirin, û bakterîvanî di nav biofilm (cfu / ml) de ji hêla dilêşiya serial (10-1 heta 10-7) ve di navbêna nehf-analîzasyona rojane de (Merck-Millipore) hejmartin. Piştî 24 saetan li ser 37 ° C, hejmarên plakaya standard li ser plakên Mueller-Hinton AGAR-ê hate kirin. Her tedawiyê û dema ku di sûkê de hate pêşandan, û hejmartinên plakê ji bo her dilopan dubare bûn.
Skinermê belengaz a pork ji jinên spî yên mezin ên jinan di nav 15 hûrdeman de kuştinê li gorî standardên firotanê yên Yekîtiya Ewropî tê wergirtin. Skinermê bi pêlên alkolê hate şilandin û paqij kirin, dûv re jî 24 demjimêran li ser 24 demjimêran diherikînin da ku çerm dev jê berdin. Piştî ku Thawing, 1 CM2 Piçûkên Skinermê sê caran bi PBS, 0,6% sodium hypochlorite hatin şûştin, û 70% etanol her carê. Berî rakirina epidermis, her etanolê mayî bi şuştina 3 caran di pbs sterile de rakirin. Skinerm di navbêna 6-baş de bi nylonek 0,45-mill-qehweyî (Merck-Millipore) li jor û 3 millipore (ML Fetal Bovine Serum (Sigma) tê guhertin Qertel. Medium (Dulbecco guhêrbar Eagle navîn - Aldrich Ltd.).
Biofilms kolonî wekî ku ji bo lêkolînên pêşanînê yên biofilm hatine diyar kirin mezin bûn. Piştî çandî biofilm li ser mîkrobê 72 demjimêran, biofilm li ser rûyê çermê bi karanîna loopek inokulasyonê ya sterî û mîkrob hate rakirin. Dûv re biofilm li ser Dermisên Pig-ê ji bo 24 saetan li 37 ° C hate veqetandin da ku biofilm bi nermik û li ser çermê Keçikê biqede. Piştî ku biofilm zuha kir û pêvekirî bû, pêşiya 1,5 cm2 bi ava distilandî ya stêrkî, rasterast ji bo 24 demjimêran di 37 ° C de hate bicîh kirin. Bakterîya viable ji hêla staining ve bi yekdengî ve tê sepandin û teknolojiyên serlêdanê yên Prestoblue, Teknolojiyên Jiyanê, Paisley, UK) li ser rûyê apical û ji bo 5 hûrdeman diaxivin. Kamera dîjîtal ya Leica DFC425 bikar bînin da ku di cih de wêneyên li ser Mîkroskopê Leica Mz8 bigirin. Herêmên rengîn rengîn bi karanîna guhertoya wêneyê pro pro 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image (MEDIACY.COM)) hejmartin. Mîkroskopiya elektronan wekî ku li jêr tête diyar kirin hate pêkanîn.
Bacteria bi şev mezin bûn 1: 100 li Mueller-Hinton Broth bûn. 200 μl Cultureand hate steril kirin 0.2 μm WhatMaMe Membrane (Whatman, Maidstone, UK) û li ser Mueller-Hinton Agar zêde kir. Plateyên biofilm li 37 ° C ji bo 72 demjimêran ji bo ku destûrdayîna damezrandina biyofilm ya mature destûrê ne hatin incubated.
Piştî 3 rojan zencîreya biofilm, bandekek çaremîn a 3 CM2 rasterast li ser biofilm hate danîn û 24 saetan li 37 ° C. Piştî ku bandora ji surface biofilm, 1 ml ya Valabûna Valabûnê ya Prestoblue (Invitrogen, Waltham, Ma) ji bo 20 hûrdeman li ser rûyê her biofilm hate zêdekirin. Berî ku guhartinên rengîn li ser kamerayek dîjîtal D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, UK), rijandin
Li ser Mueller-Hinton Culturan Amadekirin, Koloniyên Kesane ji 10 ML Mueller-Hinton Broth û li ser Shaker li 37 ° C (100 RPM) veguhestin. Piştî overnevê overnightevê, çand di nav Mueller-Hinton Broth û 300 μL de hate qewirandin . . Biofilmê pîvandî li ser birînê wekî ku li jêr tê binav kirin hate pêkanîn.
Hemî xebatên bi heywanan re li zanîngeha Manchester-ê di bin lîsansê projeyê de hate pejirandin Hemî nivîskaran li rêbernameyên hatina dest pê kirin. Heşt-hefte C57BL / 6J Mice (Envigo, Oxon, UK) ji bo hemî lêkolînên Vivo hate bikar anîn. Mişk bi isoflurane re anesthetized bûn (Piramal Care Lter Ltd, West Drayton, UK) û rûyên wan yên dorsal hatin şilandin û paqij kirin. Hingê her mişkek ji 2 × 6 mm ketiye navgînek biopsy punch (Schuco International, Hertfordshire, UK) tê dayîn. Ji bo birînên biofilm-enfeksiyonê, biofilmiya kolonyal a kolonyal li ser mîkrobê wekî ku li jor tê binav kirin wekî ku li ser birînê tê binav kirin bi karanîna loopek sterî ya birêkûpêkî piştî birîndarbûnê. Yek çarçoveya cilûbergê bi ava sterilandî ve hatî xemilandin da ku jîngehek birîna hişk biparêze. Kevir rasterast ji her birînê re hatin sepandin û bi fîlimê 3M Tegaderm (3m, Bracknell, UK) û Mastisol, Lîberalek derewîn (eloquest tenduristî, ferndale, mi) li dora perdeyan bicîhkirî. Buprenorphine (Animalcare, York, UK) di astek 0,1 mg / kg de wekî analgesic hate rêvebirin. Sêvên kulikê sê roj piştî birîndarbûnê bi karanîna rêbazê 1 rêbaz û rakirin, halve, û devera birînê wekî ku hewce ne hilînin.
Hematoxylîn (Thermofisher zanistî) û Eosin (Thermofisher zanistî) li gorî protokola hilberîner hate pêşandan. Qada birînê û reepithelialization bi karanîna guhertoya wêneyê Pro Pro (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD) hejmartin.
Beşên tûşî li xylene (thermofisher zanistî, loughborough, loughborough, Loughborough, Loughborough, Loughborough. Immunohistochemistry bi karanîna VECTASTAIN ELITE ABC PK-6104 Kit (Laboratories, Burlingame, CA) li gorî Protokola Hilberîner. Antibodies seretayî ji Neutrophils Nimp-R14 (Thermofisher MS CD107B Pure M3 / 84 ABC û vektor Nova sor Peroxidase (HRP) Kîtek Substrate (laboratorên vektorê, Burlingame, CA) û bi hematoxylîn re dijberî. Wêneyên bi karanîna Mîkroskopek Olympus BX43 û Olympus DP73 DIGITAL (Olympus, Southend-On-Sea, UK).
Nimûneyên çerm di 2,5% Glutaraldehyde û% 4% formaldehyde de hatine rast kirin (PH 7.4) 24 demjimêran li 4 ° C. Nimûneyên bi karanîna etanolê ya pola û bi karanîna quorum k850 Ltd, Loughton, UK-ê ve hatî qewirandin (Quorum Technologies Ltd Nimûneyên bi karanîna Mîkroskopê Elektronîkî ya Fei Quanton 2550-ê (Zanistîya Thermofisher) ku ji bo dîtina xala navendî ya birînê.
Toto-1 Iodide (2 μm) li ser rûyê birîna mişkî ya hişk hate bicîh kirin û ji bo 5 hûrdeman li 37 ° C (bi zanistî) û bi SYTO-60 (10 μm) ve tê derman kirin (10 mm) li 37 ° C (zanistî zanistî). Wêneyên 15 hûrdem ên Z-Minute bi karanîna Leica TCS SP8 hatin afirandin.
Daneyên biyolojîk û teknîkî yên nûhatî hatine tabûl kirin û analîz kirin bi karanîna grafpad prism v9 nermalava (nermalava grafikê, la jolla, ca). Analîzek yek-rê ya variant bi multiplesên pirjimar bi karanîna ceribandina HOC-a Dunnett re hate bikar anîn da ku ji bo cûdahiyên di navbera her dermankirinê û cil û bergên ne-antîMicrobial de ceribandin. Nirxa p <0.05 girîng hate hesibandin.
Bandora kincên fibrous yên zîvîn yekem li dijî koloniyên biofilm ên Staphylococcus Aureus û Pseudomonas Aeruginosa li Vitro hate nirxandin. Kincên zîvîn formulên cûda yên zîv hene: Kincên zîv ên kevneşopî AG1 + ions hilberînin; Kincên zîv, ku dikarin AG1 + ion piştî zêdekirina EDTA / BC hilberînin, dikarin Matrixê Biofilm hilweşînin û bakteriyan li binê bandora antîbacterial ya zîvîn hilweşînin. ions15 û kincên ku di nav salên oksîjenated de hene ku AG1 +, AG2 + û AG3 + ION hilberînin. Bandora wê bi kincê kontrolê ya ne-antîmicrobial hate çêkirin ku ji fêkiyên gelled hatî çêkirin. Bakterî ya mayînde ya di navbeynê de di navbeynkariyê de her 24 demjimêran ji bo 8 rojan hate nirxandin (Figure 1). Di roja 5 de, biofilm bi 3.85 × 105s ve hate şandin. Staphylococcus aureus an 1.22 × 105p. Aeruginosa ku başkirina biyoFilm binirxîne. Li gorî kincên kontrola ne-antîMicrobial, AG1 + Cilûberg li ser serlêdana bakterî li Staphylococcus Aureus û Pseudomonas Aeruginosa biofilms li ser 5 rojan. Berevajî vê, kincên ku tê de oksîjenated AG û + + EDTA / BC SALTS di nav 5 rojan de di kuştina bakteriyan de bandor bûne. Piştî dubarekirina dubare bi bakteriya Planktonic re roja 5-an, ti sererastkirina biofilm nehatiye dîtin (Fig. 1).
Quantification of bakteriya viable li Staphylococcus Aureus û Pseudomonas Aeruginosa Biofilms piştî dermankirinê bi kincên zîvîn. Kolonî kolonîyên Staphylococcus Aureus û Pseudomonas Aeruginosa bi kincên zîv an cilên kontrola ne-antîmicrobial hatin derman kirin, û hejmara bakteriya zindî ya mayî her 24 demjimêran hate destnîşankirin. Piştî 5 rojan, biofilm bi 3.85 × 105-ê ve hate şandin. Staphylococcus aureus an 1.22 × 105p. Kolonî ya bakterioplankton pseudomonas Aeruginosa bi şexsî hate avakirin da ku başkirina biyofilm binirxîne. Grafik Wateya +/- çewtiya standard nîşan dide.
Ji bo dîtina bandora kincên zîvîn ên li ser viable biofilm, cil û bergên li serofilmsên mature li ser çermê porcine yên li vivo hatin mezin kirin. Piştî 24 demjimêran, cil û berg tê rakirin û biofilm bi dirûvek reaktîfek şîn tê standin, ku ji hêla bakteriya zindî ve tê metabolized e. BioFilms bi kincên kontrolê re têne dermankirin şîn bû, ku hebûna bakteriyên viable di nav biofilm de nîşan dide (Figure 2a). Berevajî vê, biofilmê ku bi kincên oxysols re tê dermankirin di serî de şîn bû, ku nîşan dide ku bakteriya mayî li ser rûyê pig bakteriyan neêşandiye (Figure 2b). Rengîniya şîn û şîn a tevlihev hate dîtin biofilms ku bi kincên biofîlî ve tê dermankirin, ku nîşan dide hebûna bakteriya biofilm (Figure 2C), di heman demê de kincên edta / bc hene DESTPKN DESTPK NOTNDARN BYN NAVN NAVNETEWEY (FIGLD 2D). Quantification of the Active (Pink) and Itactive (blue) (blue) (blue) nîşan da ku patchê kontrolê% 75 çalak bû (Figure 2e). AG1 + + Kevirên EDTA / BC bi vî rengî bi cilên xwê yên Oxygenated, bi rêjeyên saxlem ên ji% 13 û 14%, bi rêzdarî hatine kirin. AG1 + Cilûberg jî ji sedî 21% kêm kir. Wê demê ev biofilms bi karanîna mîkroskopiya elektronan (Sem) têne dîtin. Piştî dermankirinê bi cil û bergên kontrolê û pêgirta Pseudomonas Aeruginosa hate veşartin Fêkiyên kolagen dikarin wekî strukturên tûj ên çermê porcine (Figure 2G) bêne hesibandin. Piştî dermankirinê bi AG1 + + EDTA / BC Dressing, plakayên bakterî û binî plakayên fîberê yên kolagen xuya bûn (Figure 2i).
Dîmenkirina Pseudomonas Aeruginosa Biofilm piştî dermankirina kincê zîv. (A-D) Bacterial Bacterial li Pseudomonas Aeruginosa Biofilms li ser çermê porcine bi karanîna PRestoblue Dye bi karanîna 24 demjimêran piştî dermankirina zîvîn an cilên kontrola ne-antîyî. Bakteriyên zindî bakterîyên rengîn, ne-viable bakterîyên pink in û şîn in. (E) Quantification of Pseudomonas aeruginosa biofilms li ser çermê porcine (Pink Spot) Bikaranîna ProMosPy Image Pro Guhertoya 10 (Fi) SEM SCALE BAR = 5 μm. (J-M) Biofilms Colonial li ser fîlteran mezin bûn û piştî 24 h bi kincên zîvîn bi diruşmeya prestoblue re hatin standin.
Ji bo destnîşankirina gelo têkiliya nêzîk di navbera kincan de û biofilms bandor li ser bandora kincan kir, biofilmên dagirker ên ku li ser rûyek rûkal hatine danîn û dûv re jî bi dyes reaktîf hatine standin. Biofilm negirtî di rengê rengê tarî de bû (Figure 2J). Berevajî biofilms ku bi kincên ku di navbêna oksîjenated de têne derman kirin, biofilms ku bi kincên ku AG1 + an AG1 + + edta / BC têne dermankirin (Figure 2l, m) nîşan dan. Ev rengê rengîn nîşanî hebûna bakterîya view e û bi qada suture di hundurê cilan de têkildar e. Van deverên sewn-li deverên mirî yên ku destûr didin bakterî di navbêna biofilm de diafirînin da ku sax bimînin.
Ji bo nirxandina bandora kincên zîvîn ên li Vivo, birînên bi tevahî yên mêjî yên ku bi S. Aureus û P. Aeruginosa bi Kontrolên Kontrolê yên Nonantimical an cilên zîv hatine derman kirin. Piştî 3 rojan dermankirinê, analîzên wêneyê MacrosCopîk dema ku bi kincên xwê yên oksîjenkirî re tê dermankirin bi kincên kontrola ne-antîmatîk û pêlavên zîvîn ên din re têne derman kirin (Figure 3a-h). Ji bo pejirandina van çavdêriyan, birînên li qada çandiniyê û birînê hatin qada kirin û reepithelialization li ser beşên tansiyonê yên hematoxylîn û eosin-stained bi karanîna guhertoya nermalava pro (Figure 3i-L) hatine hejmartin.
Bandora kincên zîvîn li ser rûyê birînê û ji nû ve epîtelîkirina birînên ku bi biyoFilms vegirtî ye. (A-H) Hucreyên piçûk ên biofilms of Pseudomonas Aeruginosa (a-D) û staphylococcus piştî sê rojan bi kincê kontrolê ya nonantimicrobial, cil û bergên oksîjî, AG1 + AG1 + paçê birîn girêdanê. Nûnerên wêneyên makroskopîk. Birînên Mişk bi AG1 + + EDTA / BC Dressing. (IL) Nûnerê Pseudomonas Aeruginosa enfeksiyonê, beşên histolojîk ên ku bi hematoxylîn û Eosin re hatine standin, ji bo quweta birînê û nûvekirina epîtelî jî tê bikar anîn. Quantification of devera birînê (m, o) û ji sedî reepithelialization (n, p) birînên bi pseudomonas aeruginosa (m, n) û staphylococcus aureus (o, p) biofilms (li gorî koma dermankirinê n = 12). Grafik Wateya +/- çewtiya standard nîşan dide. * tê wateya p = <0.05 ** tê wateya p = <0.01; Mezinahiya macroscopîk = 2.5 mm, pîvana histolojîk = 500 μm.
Quantification devera birînê di birînên ku bi Pseudomonas Aeruginosa biofilm ve girêdayî ye (hejmar 3m) rast. giringiya statîstîkî gihîşt (Figure 3m). p = 0.423). Birînên ku bi AG1 + an AG1 + + EDTA / BC re têne dermankirin, kêmbûna li devera birînê (3.1 MM2 û 3.6 MM2, bi rêzdarî) nîşan neda. Dermankirina bi kincê xwê ya oksjenated ji bo cilûbergek kontrola ne-antîMicrobial ji rêjeya kontrolê ya ne-antîmatîk (34% û 15%, û AG1 + an AG1 + + edta / BC (10% û 11%) ( Hêjmar 3n). . bi rêzdarî).
Trendên bi vî rengî di qada birînê de û nûvekirina epîtelî di birînên ku bi S. Aureus BioFilms ve girêdayî bûn (Figure 3o). Kevirên ku di navbêna zîvê ya oksîjen de tê de 23% kêm dibin, li gorî cil û bergên ne-antîMicrobial (2.6 mm2), her çend ev kêmbûn ne girîng bû (P = 0.304) (Fig. 3o). Wekî din, devera birînê di koma dermankirinê de hinekî kêm bû (2.4 mm2), dema ku birînê bi AG1 + + EDTA / BC Dressing qada birînê kêm nekir. OXYGEN SALTS OFN AG her weha ji nû ve birînên birînan bi S. Aureus biofilm (31%) ji yên ku bi kincên kontrola ne-antîmatîk têne derman kirin (% 12, P = 0.00) (Figure 3p). AG1 + Dressing (16%, P = 0.903) û AG + 1 + EDTA / BC Dressing (14%, P = 0.965) Asta nûvekirina epithelial a kontrolê nîşan da.
Ji bo dîtina bandora kincên zîvîn li ser Matrixê Biofilm, Toto 1 û Steo 60 Iodide Staining hate kirin (Fig. 4). Toto 1 Iodide dangek hucreyek-hucreyî ye ku dikare were bikar anîn da ku bi rengek acîdên nukleîk ên berbiçav, ku di epsên biofilms de pir zêde ne. SYTO 60 hucreyek dirûvê permable wekî ku wekî counterstain16 tê bikar anîn e. Obseravdêriyên Toto 1 û SYTO 60 Iodide di birînên biofilms of Pseudomonas aeruginosa (Figure 4i-l) nîşan da ku piştî 3 rojan ji dermankirinê, eps di biyofilm de biofilm kêm kêm bû. ku tê de salixên oksîjenetkirî û AG1 + + EDTA / BC. AG1 + Kincên bêyî pêkhateyên antibiofilm ên din ên ku bi birînên hucreyî yên ku bi pseudomonas aeruginosa kêm dibin, lê kêm di birînên bi staphylococcus aureus de bûn.
Di wêneya vivo ya biofilm de biofilm piştî 3 rojên dermankirinê bi kontrola an kincên zîvîn. Wêneyên Confocal ên Pseudomonas Aeruginosa (A-D) û Staphylococcus bi Toto 1 (Kesk) bi dîtina acîdên nukleîk ên ekstracellular, pêkhateyek polîmerên biofilm-ekstracellular. Da ku acîdên nukleîk ên navokî yên intracellular, syto 60 (sor) bikar bînin. acîd. P. Skniqas Mîkroskopiya Elektronîk a birînên ku bi Pseudomonas Aeruginosa (E-H) û Staphylococcus Aureus (M-P) biofilms piştî 3 rojên dermankirinê bi kontrola û kincên zîvîn ên biofilms ve girêdayî ye. SEM SCALE BAR = 5 μm. Barkirina Imaging Confocal Confocal = 50 μm.
Mîkroskopiya elektronan şermezar kir ku mîkan bi koloniyên biofilmî yên Pseudomonas Aeruginosa (Figure 4E-H) û staphylococcus di birînên xwe de piştî 3 rojên dermankirinê bi hemî kincên zîvîn re hebûn.
Ji bo ku bandora kincên zîvîn li ser mişkên biofilm-enfeksiyonê, beşên birînên biofilm-biofilm-ê bi kontrola an cilên zîvî hatine dermankirin bi karanîna antibodên taybetî yên ji bo neutrofil û makrophages hatine derman kirin. Destnîşankirina quantitative ya neutrofîl û makrofolên hundurîn. tansiyona granulasyonê. Figure 5). Hemî kincên zîvî hejmara neutrofîl û makrofolan di birînên ku bi pseudomonas aeruginosa re têkildar bûn, digel sê rojên dermankirinê bi kincên kontrola ne-antîmatîk re. Lêbelê, dermankirina bi kincê xwê ya oksîjenkirî di encama kêmbûna mezinbûnê de (p = <0.0001) û makrofages (p = <0.0001) Her çend AG1 + + EDTA / BC bandorek mezin li ser birînên biofilm hebû, ew asta neutrofil û makrofile kêm kir ji AG1 + Cilûberg. Birînên nerm bi S. Aureus BioFilm re jî dihêle piştî cilûbergê bi AG (P = <0.0001), AG1 + (P = 0.0043 EDTA / BC (P = 0.0043) Oxisols li gorî kontrolê. Trendên wiha ji bo neutropenia têne dîtin. Bandor (Fig. 5k). Lêbelê, tenê kincê xwêya oksîjenated kêmbûnek girîng a di navbêna macrofages de li gorî birînên bi S. Aureus Biofilms (P = 0.0339) (Figure 5l) nîşan da.
Neutrofîl û Macrofages di birînên ku bi Pseudomonas Aeruginosa û Staphylococcus Aureus re piştî çêkirina 3 rojan bi kontrola ne-antîmatîk an kincên zîvîn hatine qewirandin hatine hejmartin. Neutrophils (reklam) û makrofages (EH) di beşên tansiyonê de ji bo neutrofils an makrofages hatine standin. Quantification of Neutrophils (i û K) û Macrofages (J û L) di birînên ku bi Pseudomonas Aeruginosa (i û J) û Staphylococcus Aureus (K & L) biofilms vegirtî ne. N = 12 per kom. Grafik Wateya +/- Nirxên Standar, Nirxên Girîngî li gorî Dressing Kontrolê ya Ne-Antibacterial, * tê vê wateyê p = <0.05, ** tê wateya p = <0.01; *** tê wateya p = <0.001; destnîşan dike p = <0.0001).
Piştra me bandora kincên zîvîn li ser başkirina enfeksiyonê-serbixwe nirxand. Birînên ne-vegirtî bi 3 rojan cil û bergên kontrolê yên ne-antîmatîk bi kincê kontrolê ya ne-antîmatîk hate derman kirin (Figure 6). Di nav kincên zîvîn de ceribandin, tenê birînên ku bi kincên xwê yên oksîjenated têne dermankirin li ser wêneyên makroskopî yên piçûktir ji birînên ku bi kontrolê têne derman kirin (Figure 6a-D) xuya bû. Quantification of qada birînê bi karanîna analîzên histolojîk nîşan da ku bi cilên oxysols ên AG re 2.96 MM2 ji bo birînên ku bi koma kontrolê re hatine dermankirin, lê gihaştina girîngiya statîstîkî (P = 0.488) (Fig . 6E). Berevajî vê yekê, kêmbûna qada birînê piştî dermankirinê bi AG1 + (3.38 mm2, p = 01 + + edta / bc (4.18 mm2, p = 0.054) Kincên li gorî koma kontrolê. Zêdebûna nûvekirina epithelial bi ag oxysol bi koma kontrolê re hat dîtin (30% li dijî 22%, bi rêzdarî), her çend ev ne girîng bû jî (encamên pir girîng û piştrast dike. Kincê bi oxysol re ji nû ve epithelialization pêşve dike. -Opithelelization of birînên bêpergal17. Berevajî vê, dermankirin bi AG1 + an AG1 + + EDTA / BC Cilûbergê bandor nekiriye an nîşan neda ku ji nû ve kontrolê kêm bû.
Bandora birînên zîvîn ên zîvîn li ser êşa birînê di mişkên bêpergal de bi reseniya bêkêmasî. (Ad) Nûnerê Macroskopîk ên birînên birînên piştî sê rojên dermankirinê bi kincê kontrolê ya ne-antîmatîk û cilê zîvîn. (EH) Beşên birînên birînê yên nûnerê bi hematoxylîn û Eosin re hatine standin. Quantification of qada birînê (I) û sedî ji reepithelialization (j) ji navbêna birînê bi karanîna nermalava analîzên wêneyê (N = 11-12 li gorî koma dermankirinê) hate hesibandin. Grafik Wateya +/- çewtiya standard nîşan dide. * tê wateya p = <0.05.
Zîv xwedî dîrokek dirêj a karanîna wekî dermankirina antimicrobial e, lê gelek formulasyonên cihêreng û rêbazên radestkirinê dibe ku di encama bandorên antîmîk ên 18-an de bibe sedema cûdahiyan. Wekî din, Taybetmendiyên antîbiofilm ên pergalên teslîmkirina zîvîn ên taybetî bi tevahî nayê fêm kirin. Her çend bersiva bêserûberiya mêvandar bi qasî bakterîyên Planktonic bandor e, ew bi gelemperî li dijî Biofilms19 kêmtir bandor e. Bakterîên Planktonîk bi hêsanî ji hêla Macrofages ve têne qewirandin, hucreyên hevgirtî pirsgirêkên mêvandariyê bi sînor dikin Hatiye dîtin ku hin leukocytes dikarin biofilms21 têkevin lê gava ku ev parastin lihevhatî ye22 nekare bakteriya Phagocytose. Pêdivî ye ku nêzîkatiyek holîstîkî were bikar anîn da ku piştgiriyê bide bersivê ya bêserûber a li dijî enfeksiyonê yaofilm. Daxistina birînê dikare biofilm hilweşîne û piraniya bioburdiyê hilweşîne, lê bersiva bêserûberiyê ya mêvandar dibe ku li dijî biofilm bimîne, nemaze eger bersiva bêserûber were cîbicîkirin. Bi vî rengî, terapiyên antimicrobial ên wekî kincên zîv dikarin piştgiriyê bidin bersivê bêserûber û enfeksiyonên biofilm. Berhevok, berhevkirin, solubility, û substrate radest dikare bandorê li bandora antimicrobial ya zîvîn bike. Di salên dawî de, pêşkeftinên di teknolojiya pêvajoyê zîv de van kincan ji wan re bandorker9,23 kir. Wekî pêşkeftinên teknolojiya zîvîn, girîng e ku bandora van kincan di kontrolkirina enfeksiyonê ya birînê de fêm bike û, girîngtir, bandora van formên bihêz ên zîvîn li ser hawîrdora birînê û başkirinê.
Di vê lêkolînê de, me bandora du kincên zîvîn ên pêşkeftî bi kincên zîvîn ên kevneşopî re berhev kir ku AG1 + ion li dijî biofilms bi karanîna di vitro û di modelên Vivo de cûda dike. Di heman demê de me bandora van kincan li ser hawîrdora birînê û hembêzkirina serbixwe ya serbixwe nirxand. Ji bo kêmkirina bandora matrixê ya radestkirinê, hemî kincên zîv hatine ceribandin ji karboxymycellulose pêk hatin.
Nirxandina me ya pêşîn a van kincên zîvîn ên li dijî Kolonyalên biofilmên PseudoMonas Aeruginosa û pêşandanên kevneşopî yên AGROCED, BC û OCYGENTATED li 5-ê bandorker in. Bi bandorek bakteriyan biofilm kuşt çend rojan. Wekî din, ev kincan pêşî li damezrandina biyoFilm digirin piştî ku dubare li ser bakteriya planktonîk dubare dike. AG1 + Cilûberg di nav de Chloride zîvîn, heman Matrixê ya zîv û Base wekî AG1 + + EDTA / BC, û bandorek sînorkirî ya li ser biofilm di heman heyamê de hebû. Obsavdêriya ku AG1 + + BC Ciling li dijî Biofilm-ê ji yaofilm-ê ji hêla heman matrix û komek zîvîn ve girêdayî ye ku ji bo zêdekirina karên zîvîn ên li dijî Biofilm, wekî ku hatiye ragihandin, piştgirî dike ElsEwhere15. Van encaman piştgiriyê didin ramana ku BC û EDTA-ê ji bandora cilûbergê ya giştî re dilîze û dibe ku nebûna vê pêkhatê di AG1 + CLEIDESS de dibe ku ji ber neheqiyê nîşan bide. Me dît ku kincên xwê yên oksîjenated hilberîna AG2 + û AG3 + ions ji AG1 + û di astên mîna AG1 + + EDTA / BC de bandorek antibacterial antibacter nîşan didin. Lêbelê, ji ber potansiyela sor a bilind e, ne diyar e ka çiqas dirêj AG3 + ions li hember birînên birînê çalak û bandor dimînin û ji ber vê yekê lêkolînek din jî bikin. Wekî din, gelek kincên cihêreng hene ku AG1 + ionên ku di vê lêkolînê de ne hatine ceribandin hilberînin. Van kincan ji pêkhateyên zîv, tevlihevî, û matrikên bingehîn pêk tê, ku dibe ku bandor li radestkirina AG1 + ion û bandora wan li dijî biofilms bandor bikin. Di heman demê de hêja ye ku di Vitro de gelek cûda cûda hene û di modelên Vivo de ji bo nirxandina bandora birînên birînê li dijî biofilms bikar anîn. Cûreyek modela ku tête bikar anîn, û her weha naveroka xwê û proteîn a medya ku di van modelan de tê bikar anîn, dê bandorê li bandora cilan bikin. Di Modela Vivo de, me destûr da ku biofilm di Vitro de pîr bibe û piştre ew veguhest ku li ser rûyê birînê yê birînê. Bersiva Mouse ya Mouse-ê ya ku li dijî bakteriya Planktonic li ser birînê hatî sepandin, bi vî rengî bandorker e, bi vî rengî biofilmek ku birînên birînan pêk tîne. Zêdekirina biofilmek mature ji bo birîndariya bersivdana mêvandarê mêvandariyê ya bersivdayîna biofilm re sînordar dike. Bi vî rengî, modela me rê dide me ku em bandora kincên antîmîkrobî li ser biofilmên mature li pêşiya birînan dest pê bikin binirxînin.
Di heman demê de me dît ku cilê cilê bandor li bandora kincên zîvîn li ser biofilmsên vitro-mezinahî û çermê porcine. Têkiliya nêzîk bi birînê re ji bo bandora antîimicrobial ya kincê24,25 krîtîk tê hesibandin. Kevirên ku di nav salên COXYGENTATED de ne di têkiliyek nêzîk de bûn, di encama kêmkirina hejmarek bakteriya berbiçav de di navbêna biofilm de piştî 24 demjimêran. Berevajî vê, dema ku bi AG1 + û AG1 + + EDTA / EDTA / EDTA / BC re tê derman kirin, hejmarên girîng ên bakterîya view in. Van kincan li seranserê dirêjahiya cilan, ku valahiyên mirî diafirînin hene ku pêşî li têkiliya nêzîk bi Biofilm re digirin. Di lêkolînên vitro de, ev deverên ne-têkiliyê pêşî li kuştina bakteriyên zexm ên di navbêna biofilm de nehiştin. Me tenê piştî 24 demjimêran dermankirina baca bakterî nirxand; Bi demê re, ji ber ku cil û bergantir dibe, dibe ku cîhê kêm mirî hebe, ji bo van bakteriyên zexmî kêm bike. Lêbelê, ev girîngiya pêkanîna kincan ronî dike, ne tenê celebê zîv di kincan de ye.
Dema ku di lêkolînên Vitro de ji bo berhevkirina teknolojiyên zîvîn ên cûda kêrhatî ne, ji bo famkirina bandora van kincan li Vivo, ku bersivên mîhrîcanê û bersivên nehsanî li dijî breofilms li dijî biofilms. Bandora van kincan li serofilmên birînê hate dîtin ku bi karanîna mîkroskopiya elektron û epsên eP-ê biofilm bi karanîna dna intracellular û ekstracellular bi karanîna dna intracellular û ekstracellular. Me dît ku piştî 3 rojên dermankirinê, hemî kincan di birînên biofilm-enfeksiyonê de bandor bûne, lê ag1 + cil û bergên bi birînên hişk ên Staphylococcus kêmtir bandor bûne. Mîkrosopiya elektronan jî nîşan da ku bi giranî bakteriyan di birînên zîvîn de tê dermankirin, her çend bi cil û bergên AG1 + EDTA / BC-ê re li gorî AG1 + Cilûberg bû. Van daneyan destnîşan dikin ku kincên zîvîn ên ku li ser strukturên biofilm cûdatir bûne, lê yek ji kincên zîvî ji ber ku hewcedarîyek ji bo dermankirina enfeksiyonên biofilm-ê piştgirî dikirin; karanîna zirarên zîvîn. Derman ji hêla hezkiriya laşî ve tê pêşbînîkirin da ku piraniya biofilm derxe.
Birînên kronîk bi gelemperî di rewşek giran a enfeksiyonê de ne, bi hucreyên giran ên birînê ji bo demek dirêj ve dimînin, dibe sedema zirara tansiyonê û ji bo birêkûpêkên hucreyî yên bi bandor li ser birêkûpêk26. BioFilms Ev hawîrdora birîna dijminatî ji hêla neyînî ve di nav awayên cûrbecûr de, di nav de astengkirina hucreyên hucreyê û koçberî û çalakkirina cytokines27. Her ku kincên zîvîn bêtir dibin bandor dibe, girîng e ku bandora wan li ser hawîrdora birînê û başkirinê fêm bike.
Bi balkêş, her çend hemî kincên zîvî bandor li serhevoka biyofilm, tenê kincên xwê yên zîvîn ên oksîjen zêde bûne ji nû ve zêde kirina van birînên enfeksiyonê. Van daneyan piştgiriyê didin dîtinên me yên berê17 û yên Kalan Erê. (2017) 28, ku ewlehiya baş û toksiyonên xweyên zîvîn ên oksîjenkirî nîşan da, wekî ku bala xwe li ser biofilms bi bandor bûn.
Lêkolîna me ya heyî cûdahiyên li teknolojiya zîv di navbera kincên zîvîn ên antîmîk û bandora vê teknolojiyê de li ser jîngehê birînê û başkirina serbixwe-serbixwe. Lêbelê, van encaman ji xwendina berê cûda dibe ku ew AG1 + + EDTA / BC Kincê xweşkirina bihurî ya guhên Rabbit ên birîndar ên li Vivo. Lêbelê, dibe ku ev ji ber cûdahiyên di modelên heywanan de, demên pîvandinê, û rêbazên serlêdana bakterî, û rêbazên serlêdana bakterî. Di vê rewşê de, pîvandinên birînê ji 12 rojan şûnda birîndar bûn da ku destûrê bide ku hêmanên çalak ên cilan li ser biofilm li ser demek dirêjtir tevbigerin. Ev ji hêla lêkolînek ku nîşan da ku ulsên lingên xwe yên ku bi AG1 + + EDTA / BC re hatine dermankirin, di destpêka yek hefte de, di nav 3 hefteyên din de bi AG1 + + EDTA / BC û di nav 4 hefteyan de zêde bûn karanîna ne-antîmîkrobên. derman. Kincên CMC ji bo kêmkirina mezinahiya ulsers30.
Hin form û tevneyên zîvîn berê hatine destnîşan kirin ku di Vitro 11 de li CitoToxic in, lê ev di encamên Vitro de her gav di nav bersivên neyînî de wergerînin. Wekî din, di teknolojiya zîv û têgihiştina çêtir a kompleks û tevliheviyên zîvîn de pêşkeftinên di kincan de rê li ber pêşkeftina gelek kincên zîv û bi bandor bû. Lêbelê, wekî pêşkeftinên teknolojiya zîvîn, girîng e ku hûn bandora van kincan li ser jîngehê birînê31,32,33 fêm bikin. Berê ragihand ku zêdebûna rêjeya ji nû ve epithelialization bi rêjeya zêdebûna macrofages ya dij-inflamator re têkildar e ku bi phenotype pro-inflamator re têkildar bû. Ev di modela mîzê ya berê de hate destnîşankirin ku cilên birîna zîvîn ên zîvîn bi sulfadizina zîvîn û ne-antîmatîk bi hevra bûn.
Birînên kronîk dibe ku êşa giran nîşan bide û tê dîtin ku hebûna neutrofilên zêde dibe ku zirarê bide healing35. Di lêkolînek li mişkên neutrofîl de, hebûna neutrofils reepithelialization dereng. Hebûna neutrofilên zêde rê li ber protectasyonên bilind û cûreyên oksîjena reaktîf, wek peroxide superoxide û hîdroxî, ku bi birînên kronîk û hêdî-hêdî re têkildar dibin37,38 in. Bi heman rengî, zêdebûna hejmarên makrofage, heke bê kontrol be, dikare bibe sedema derketina birîna dereng39. Ev zêdebûn bi taybetî girîng e heke macrofages ji fenotîpek pro-inflamator a phenotype pro-wergirtî re derbas bibe, encama birînên ku ji bo derketina qonaxa enflasyonê ya Healing40 derket. Me piştî 3 rojên dermankirinê bi birînên biofîlî û macrofîlan re kêmbûn û makrofolan li ser birînên biofilm-biofilm-inofilm-ê li ser birînên biofilm-bifiran dît, lê kêmbûn bi kincên xwê yên oksîjen ve bêtir diyar bû. Dibe ku ev kêmbûn encamek rasterast ji zîvê be, bersivek ji bo kêmbûna bioburden, an birînê di qonaxa paşê ya başbûnê de ye û ji ber vê yekê hucreyên ku di birîn de kêm dibin. Dibe ku hejmara hucreyên enflasyonê yên di birînê de kêm bike dibe ku jîngehek ji bo birîndarkirina birînê bimîne. Mekanîzmaya çalakiyê ka ka Oxsalts çawa başkirina enfeksiyonê ye, lê hebûna AG oxysals hilberîne û astên zirarê yên hîdrojenê, navbeynek enfeksiyonê hilweşîne, dibe ku vê yekê rave bike û bêtir lêkolîn bike.
Kulîlkên ne-başkirina kronîk ji bo bijîjk û nexweşan pirsgirêkek çêdikin. Her çend gelek kincan îdîaya bandorbûna antimicrobial, Lêkolîn kêm caran balê dikişîne ser faktorên din ên mayîn. Vê lêkolînê destnîşan dike ku teknolojiyên zîvîn ên cûda xwedan bandorek antimicrobial cuda ne û bandorên cûda yên li ser jîngehê birînê û başkirinê, serbixwe ji enfeksiyonê. Her çend van Vitro û di Lêkolînên Vivo de bandora van kincan di dermankirina enfeksiyonên birînan de destnîşan dikin, ceribandinên kontrolkirî yên kontrolkirî hewce ne ku bandora van kincan li klînîkê binirxînin.
Di dema xwendina heyî de datazeyên ku hatine bikar anîn û / an analîz kirin ji nivîskarê têkildar li ser daxwazek maqûl peyda dibin.
Demjimêra paşîn: Jul-15-2024